廣東首例非洲豬瘟疫情的診斷、處置過程以及疫點(diǎn)消毒效果評價

  • 點(diǎn)擊次數(shù):
  • 日期: 2019-03-22
  • 來源: 中國動物檢疫

2018年12月17日,珠海市畜牧獸醫(yī)主管部門接到香洲區(qū)報告,稱轄區(qū)內(nèi)某生豬定點(diǎn)屠宰場有豬只異常死亡之后確診為非洲豬瘟疫情,此次疫情為廣東省首例ASF疫情,也是我國公布的第93起ASF疫情。本文通過總結(jié)廣東省首例ASF疫情的診斷和處置過程,為ASF的排查、臨床診斷和處置提供參考。

一、發(fā)病情況  

疫情發(fā)生地為珠海市主城區(qū)某生豬定點(diǎn)屠宰場。屠宰場有圍墻與外面道路隔離,周圍3 km范圍內(nèi)無生豬養(yǎng)殖場和生豬交易市場。發(fā)病豬同批次共50頭,由一輛運(yùn)豬車裝載進(jìn)入屠宰場。根據(jù)貨主攜帶的“動物檢疫合格證明(動物A)”溯源,該批生豬來源于廣東省佛山市某小型養(yǎng)豬場。據(jù)調(diào)查,該養(yǎng)豬場早期曾飼喂過泔水,后改用商品飼料。該批次生豬按時間分階段死亡3頭、6頭、2頭,共計11頭。

二、臨床診斷  

臨床癥狀 

部分發(fā)病豬精神不振,站立不穩(wěn),體溫升高,40-41℃,扎堆,個別豬排血便、脫肛(圖; 1-A) ;有的病豬四肢、耳朵、腹部和臀部皮膚發(fā)紺(圖1-B),亦有個別豬表現(xiàn)頭部、鼻部充血潮紅癥狀。由于病程不同,豬群個體間表現(xiàn)出的臨床癥狀存在一定的差異。

臨床癥狀 

剖檢病理變化

對11頭病死豬全部剖檢發(fā)現(xiàn):脾臟腫大、增厚、變寬,約為正常的2~3倍,且發(fā)黑、質(zhì)脆(圖2-A),腎臟腫大,嚴(yán)重淤血,表面呈現(xiàn)彌漫性的黑色淤血斑(圖2-B),或淤血壞死、發(fā)黑(圖2-C、D)  ,小腸漿膜呈現(xiàn)彌漫性紅色出血點(diǎn)(圖2-E)或血管網(wǎng)狀充血(圖2-F):頜下淋巴結(jié)腫大,顏色發(fā)紫(圖2-G)。由于病程不同或個體耐受差異,部分病死豬內(nèi)臟并未出現(xiàn)明顯的病理變化。在不同的發(fā)病豬中,出現(xiàn)病理變化的內(nèi)臟器官個數(shù)也不盡相同,不同發(fā)病豬,同一個內(nèi)臟器官,其病變程度亦有差異。

三、采樣送檢與確診 

按照《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范(試行)》和《非洲豬瘟疫情應(yīng)急預(yù)案》要求,采集3頭剖檢病變程度不同的病死豬脾臟樣品,送廣東省動物疫病預(yù)防控制中心實驗室檢測。經(jīng)熒光PCR方法檢測,3份樣品均為ASFV核酸陽性(圖3)。將3份樣品送中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心國家外來動物疫病研究中心檢測,確診為ASF。

采樣送檢與確診 

四、疫點(diǎn)消毒與效果評價 

疫情發(fā)生后,當(dāng)?shù)卣⒓磫又卮髣游镆咔閼?yīng)急響應(yīng),按照《廣東省非洲豬瘟突發(fā)疫情應(yīng)急處置預(yù)案》,發(fā)布封鎖令,劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū),嚴(yán)格處置疫情。其中,在疫區(qū)內(nèi)無害化處理了所有易感動物及其排泄物、污水等,對疫點(diǎn)進(jìn)行了全面徹底地清理和消毒,同時對不同時間的消毒效果進(jìn)行評價,并將其作為疫區(qū)解封的重要參考指標(biāo)。

消毒

按照《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范(試行)》規(guī)定,并參考聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)同,采用生石灰、燒堿和消特靈(二氯異氰尿酸鈉)對疫點(diǎn)進(jìn)行全面消毒,對環(huán)境使用40%辛硫磷溶液滅殺蜱蟲。

消毒范圍包括地面、車間、器具、欄舍、車輛和人員等。第1周,每天消毒5次,其中大規(guī)模消毒3次,小規(guī)模消毒2次,1周后,每天保持消毒1~3次,直至環(huán)境樣品中不再檢出ASFV核酸,然后逐漸降低消毒頻次,直至解除封鎖。  

效果評價

效果評價  

分別于消毒1、3、7、15、17、 19d后,采集:環(huán)境樣品20-26個,采樣盡量覆蓋疫點(diǎn)內(nèi)所有環(huán)境狀況。采用磁珠法提取樣品DNA,利用熒光PCR方法進(jìn)行ASFV核酸檢測。

檢測結(jié)果顯示:消毒1 d后有2個樣品呈陽性(圖4-A),陽性樣品采集點(diǎn)為屠宰場器具和豬圈柵欄: 3d后有1個樣品呈陽性(圖4-B) ,陽性樣品采集點(diǎn)為剖檢案板;7d后有2個樣品陽性(圖4-C),陽性樣品采集點(diǎn)為車間整板和瓷磚縫隙: 15、 17、 19d 后全部樣品檢測結(jié)果均為陰性!

五、討論  

廣東省首例ASF疫情為一起發(fā)生在屠宰場的外地輸入性疫情,通過對這起疫情的及時準(zhǔn)確診斷和有效處置,實踐了ASF疫情防控的既定策略,且豐富了ASF的臨床觀感。診斷過程中發(fā)現(xiàn),豬群在感染ASFV后,臨床表現(xiàn)差異較大,即使在急性死亡病例中,也并不一定會出現(xiàn)經(jīng)典文獻(xiàn)中描述的典型癥狀和病理變化。

病死豬剖檢后,有的呈現(xiàn)明顯的病理變化,有的則完全看不出病變,出現(xiàn)病變的內(nèi)臟器官,其病理變化程度也不盡相同,這在一定程度上給ASF的臨床診斷和疫情排查帶來了一定的困難。因此,必須結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查,通過群體觀察以及盡可能多的個體診斷,如豬群出現(xiàn)發(fā)熱或無癥狀突然死亡,剖檢后小腸漿膜出血,腎臟淤血,脾臟腫大等,經(jīng)綜合分析作出初步診斷,確診必須借助實驗室診斷。 

豬群感染ASFV到發(fā)病有一定的潛伏期,而處于潛伏期內(nèi)的生豬臨床上可能不易被發(fā)現(xiàn)。這是ASF防控的難點(diǎn),因為潛伏期內(nèi)的感染豬存在散毒風(fēng)險。這就需要對疫情盡早排查、確認(rèn),以及對疫點(diǎn)內(nèi)的易感動物盡早進(jìn)行銷毀處置。建議在ASF疫情的排查和診斷過程中,在政府管理部門許可的條件下,按照早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早處置的原則進(jìn)行疫情處置。 

從對疫點(diǎn)消毒效果的監(jiān)測結(jié)果看,消毒1d后,地面已檢測不到病毒核酸,但立面的消毒效果不如地面,臂如墻面、柵欄、器具等在消毒1d后仍能,檢測到病毒核酸,一些墊板、角落或縫隙,由于消毒或沖洗可能不如地面充分,在消毒7 d后仍然能檢測到病毒核酸。因此,對于墊板、角落或縫隙這些隱秘的地方,在消毒時絕不容忽視,在條件允許的情況下,建議采用火焰噴槍以火焰焚燒的方式殺滅病毒,避免這些地方成為病毒的“庇護(hù)所”。

在時間上,無論是地面還是立面,消毒15d后,疫點(diǎn)內(nèi)已檢不到病毒核酸。特別需要指出的是,環(huán)境樣品中檢測到病毒核酸,只能提示該環(huán)境存在生物安全風(fēng)險,并不表示該環(huán)境一定具備傳染源屬性。ASFV為雙鏈DNA病毒,相比RNA病毒,其核酸在外環(huán)境中具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性,核酸檢測陽性理論上不能證明具有感染和復(fù)制能力的活病毒存在圖。因此,在全面消毒后,須對環(huán)境進(jìn)行徹底清洗,而且清洗效果直接影響環(huán)境樣品的核酸檢測結(jié)果。 

參考文獻(xiàn): 

[1] 世界動物衛(wèi)生組織(OIE) .陸生動物診斷試驗與疫苗。 手冊:哺乳動物、禽類與蜜蜂,下卷[M]. 農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局,組譯。7版,北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 2012.

[2] OIE. WAHIS[DB/OL]. [2018-12-20]- ht:/:/www.oie.int/wahis_ 2/public/wahid.php Diseaseinformation/ Immsummary,

[3] BELTRAN-ALCRUDO D, ARIAS M, GALLARDOC,et al.非洲豬瘟:發(fā)現(xiàn)與診斷-獸醫(yī)指導(dǎo)手冊 [M].農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸醫(yī)局,中國動物疫病預(yù)防與控制中心,組譯.羅馬:聯(lián)合國糧食與農(nóng)業(yè)組織(FAO) , 2018.

[4] KING D P, REID S M,HUTCHINGS G H, et al,Devclopment of a TaqMan PCR assay with internal amplifcation control for the detection of African swinefever virus[]. Joumal of virology methods, 2003, 107(I) : 53-61.

[5]王清華,任煒杰,包靜月,等.我國首例非洲豬瘟的確診[D]中國動物檢疫,2018, 35 (9) ; 1-5.

[6] 陳昌海,董永毅,開妍,等,江蘇首例非洲豬盛現(xiàn)場診斷報告[D]_中國動物檢疫,2018. 35 (9) : 5-8.

[7] ZIMMERMANJJ, KARRIKER LA, RAMIREZ A,etal.豬病學(xué)[M].趙德明,張仲秋,周向梅等,主譯,10版.北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2014.

[8]中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱 獸醫(yī)研究所.獸醫(yī)微生物學(xué)M.2版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2013.